Grupo Micoplasmas

El grupo de los micoplasmas de interés clínico (clase Mollicutes, destacando los géneros Mycoplasma y Ureaplasma) comprende los microorganismos de vida libre más pequeños conocidos. Carecen de pared celular peptidoglicánica, lo que les confiere pleomorfismo intrínseco y resistencia natural a los antibióticos betalactámicos.

Algoritmo e identificación microbiológica:

  • Examen directo y tinción: Al carecer de pared celular, no se tiñen con la tinción de Gram.

  • Requerimientos de cultivo: Microorganismos extremadamente exigentes. Requieren esteroles (colesterol), precursores de ácidos nucleicos y suero.

    • Mycoplasma pneumoniae: Crecimiento lento (1 a 3 semanas) en agar PPLO; colonias microscópicas con aspecto característico en "huevo frito".

    • Ureaplasma urealyticum / U. parvum: Requieren urea para su metabolismo. Hidrolizan la urea produciendo amonio (viraje de pH) en caldos selectivos (medio 10B).

    • Mycoplasma hominis: Metaboliza la arginina (viraje de pH) y desarrolla colonias microscópicas en "huevo frito" en 48–72 horas.

Actualización tecnológica y taxonómica: Debido a la extrema lentitud del cultivo y a la labilidad de los especímenes, el diagnóstico por cultivo y serología (fijación de complemento o aglutininas frías) ha sido completamente desplazado por las pruebas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT / PCR en tiempo real) como estándar de oro, integradas en paneles moleculares multiplex para infecciones del tracto respiratorio e infecciones urogenitales y de transmisión sexual (ITS).

Fuente:

  1. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

  2. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.

  3. Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15th ed. St. Louis: Mosby/Elsevier; 2021.

 

micoplasmas

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Bacterias Intracelulares

Las bacterias intracelulares de interés clínico comprenden patógenos obligados (Chlamydia, Rickettsia, Coxiella) y facultativos (Legionella, Brucella, Listeria, Mycobacterium), caracterizados por invadir y replicarse en células hospedadoras humanas, lo que dificulta su desarrollo en medios sintéticos convencionales.

Algoritmo e identificación microbiológica:

  • Examen directo y tinciones especiales: Tienen escasa o nula tinción con Gram. Se emplean la tinción de Giménez (Rickettsia, Coxiella), Giemsa (Chlamydia), Ziehl-Neelsen / Kinyoun (Mycobacterium) o inmunofluorescencia directa.

  • Aislamiento y cultivo:

    • Intracelulares obligadas: Requieren cultivo celular (líneas HeLa, McCoy) o huevos embrionados, restringido a laboratorios de alta bioseguridad (BSL-3).

    • Intracelulares facultativas: Exigen medios enriquecidos específicos (BCYE para Legionella; agar Brucella / suero-dextrosa para Brucella).

Actualización tecnológica y taxonómica: El cultivo celular diagnóstico ha sido casi totalmente desplazado por la PCR en tiempo real y los paneles moleculares multiplex (amplificación de ácidos nucleicos - NAAT), que ofrecen máxima sensibilidad en muestras tisulares, sanguíneas o exudados. Para organismos facultativos aislados en cultivo, la espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) constituye el estándar de identificación de especie. En patógenos obligados como Coxiella burnetii o Rickettsia spp., la serología automatizada (IFA / ELISA) complementa el diagnóstico molecular.

Fuente:

  1. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

  2. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.

  3. Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15th ed. St. Louis: Mosby/Elsevier; 2021.

 

intracelulares

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Anaerobios Gramnegativos No esporulados

El grupo de bacilos y cocos Gram negativos anaerobios no esporulados comprende especies de la microbiota comensal humana implicadas en infecciones polimicrobianas profundas (abcesos, peritonitis e infecciones de tejidos blandos).

Algoritmo e identificación microbiológica:

  • Muestras y cultivo: Procesamiento en anaerobiosis estricta (85 % N₂, 10 % CO₂, 5 % H₂). Medios enriquecidos como Agar Brucella con hemina y vitamina K₁, e inhibidores selectivos como Agar BBE (Bacteroides Bile Esculin) y LKV (Laked Blood Kanamycin Vancomycin).

  • Diferenciación por discos de sensibilidad y bilis:

    • Grupo Bacteroides fragilis: Bacilos pleomórficos, resistentes a la bilis al 20 %, hidrolizan la esculina (colonias negras en BBE) y son resistentes a colistina, vancomicina y kanamicina.

    • Prevotella spp.: Sensibles a la bilis, pigmentadas (marrón/negro) o no pigmentadas, muestran fluorescencia roja a luz UV (365 nm).

    • Porphyromonas spp.: Asacarolíticas, sensibles a la bilis y a la vancomicina (5 µg).

    • Fusobacterium spp.: Bacilos fusiformes (F. nucleatum) o pleomórficos (F. necrophorum), sensibles a kanamicina y colistina.

    • Veillonella spp.: Diplococos pequeños asacarolíticos, reductores de nitratos.

Actualización tecnológica: La taxonomía ha reclasificado varias especies de Bacteroides y Prevotella. La identificación bioquímica convencional se ha sustituido por la espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) como estándar de oro para identificación de especie en minutos. En cultivos negativos por tratamiento antibiótico previo, se emplea la PCR multiplex y secuenciación del gen 16S rRNA.

Fuente:

  1. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

  2. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.

  3. Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15th ed. St. Louis: Mosby/Elsevier; 2021.

 
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Bacterias Espirales

El grupo de bacterias espirales de importancia médica comprende microorganismos con morfología helicoidal o espiralada, con requerimientos microaerófilos o anaerobios, destacando los géneros Campylobacter, Helicobacter, Spirillum y las espiroquetas (Treponema, Borrelia y Leptospira).

Identificación microbiológica:

  • Morfología y tinción: Bacilos curvos o en "alas de gaviota" (Campylobacter), espirales rígidas (Spirillum) o espirales flexibles (Treponema, Leptospira). Las espiroquetas no se tiñen bien con Gram y requieren microscopía de campo oscuro, tinción de impregnación argéntica o inmunofluorescencia.

  • Pruebas clave y cultivo:

    • Campylobacter spp.: Microaerófilo (5 % O₂, 10 % CO₂), termotolerante (crece a 42 °C en medio Campy-BAP), oxidasa (+) y catalasa (+).

    • Helicobacter pylori: Microaerófilo, oxidasa (+), catalasa (+) y ureasa fuertemente positiva rápida (clave en muestras biopsiadas).

    • Leptospira spp.: Exigente, requiere medios enriquecidos con ácidos grasos y suero (EMJH) con incubación prolongada a 28–30 °C.

Actualización tecnológica: La taxonomía de este grupo se ha reestructurado activamente mediante filogenia del gen 16S rRNA. El cultivo de espiroquetas y bacterias exigentes ha sido ampliamente desplazado por la espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) para aislamientos primarios y por paneles moleculares (PCR en tiempo real / multiplex) para detección directa en muestras clínicas. El diagnóstico de H. pylori prioriza métodos no invasivos como la prueba del aliento con urea ¹³C/¹⁴C y la detección de antígeno en heces.

Fuente:

  1. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

  2. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.

  3. Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15th ed. St. Louis: Mosby/Elsevier; 2021.

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