Identificación Clostridioides difficile

Esporas Clostridioides difficile. 

Fuente: Calle, S. Atlas de Bacteriología. FAMV-UNMSM. 2012

Clostridioides difficile (anteriormente Clostridium difficile) comprende bacilos Gram positivos anaerobios estrictos, esporulados y móviles. Constituye el principal agente etiológico de la diarrea asociada a antibióticos y de la colitis pseudomembranosa, patologías mediadas por sus exotoxinas principales: ToxinA (tcdA, enterotoxina) y Toxina B (tcdB, citotoxina).

Identificación microbiológica:

• Morfología y tinción: Bacilos Gram positivos largos y finos con esporas subterminales de aspecto en "palillo de tambor".

• Cultivo e identificación colonial:

  • Agar CCFA (Cefoxitina-Cicloserina-Fructosa): Medio selectivo donde desarrolla colonias irregulares, planas, amarillentas con aspecto en "cuadro de bambú" o "rosa", que fluorescen de color verde-amarillento bajo luz UV (365 nm) y desprenden un olor característico a estiércol o establo (por producción de p-cresol).

• Pruebas bioquímicas: Glutamato deshidrogenasa (GDH) positiva y prolina aminopeptidasa positiva.

Actualización tecnológica y diagnóstico en dos pasos: El cultivo de rutina no diferencia cepas toxigénicas de no toxigénicas. El consenso diagnóstico actual recomienda un algoritmo en dos pasos:

1. Detección inicial: Inmunoensayo para GDH (marcador de presencia del microorganismo) o NAAT / PCR en tiempo real para genes de toxinas (tcdA, tcdB y toxina binaria cdtA/cdtB).

2. Confirmación de toxina activa: Inmunoensayo de detección directa de Toxinas A y B en heces. La espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) realiza la confirmación rápida de especie a partir de cultivos.

Fuente:

1. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

2. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.

3. Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15th ed. St. Louis: Mosby/Elsevier; 2021.