Género Pseudomonas

Lectura e identificación de cultivos: En agar MacConkey, Pseudomonas aeruginosa se identifica como bacilo Gram negativo no fermentador de lactosa (colonias incoloras o verdosas). Se reconoce por su morfología colonial grande, plana y de bordes irregulares o apergaminados, a menudo con brillo metálico (pigmento piocianina/pioverdina difusible en el medio) y un aroma frutal distintivo (similar a uva o jazmín).

Procedimiento de inoculación en batería de pruebas y pruebas de termotolerancia:

1. Selección y esterilización: Seleccionar la colonia aislada en agar MacConkey. Flamear el asa recta al rojo vivo y dejar enfriar.

2. Siembra primaria diferencial: Tomar la colonia e inocular en orden estricto:

   • Citrato de Simmons: Siembra por estría en el bisel (superficie).

   • TSI y LIA: Inoculación por picadura profunda central y siembra en la superficie inclinada (sin fermentación: alcalino/alcalino, K/K).

   • Caldo Peptonado (Indol) y Caldo Nitrato: Inoculación en medio líquido.

   • Agar Gelatina y Agar Movilidad: Inoculación por puntura central profunda (1,5 a 2,5 cm).

3. Subcultivo y prueba de termotolerancia (42 °C):

   • Con el asa esterilizada, tomar de nuevo la misma colonia y sembrar por agotamiento en placas de TSA o Mueller-Hinton.

   • Incubar una placa a 35–37 °C y otra a 42 °C durante 18 a 24 horas (como alternativa, usar tubos TSB/BHI a 42 °C en baño maría).

Actualización tecnológica y taxonómica: Pseudomonas aeruginosa es un bacilo Gram negativo no fermentador, oxidasa positivo y catalasa positivo. Su capacidad de desarrollo a 42 °C y la producción de piocianina son claves para diferenciarla de otras especies del género (P. putida, P. fluorescens). En la práctica clínica actual, el diagnóstico rápido de especie y la detección de carbapenemasas (MBL como VIM o IMP) se realizan rutinariamente por espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) o PCR en tiempo real.

Identificación Pseudomonas aeruginosa

Fuente:

1. Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. MINSA-INS. 2005

2. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

3. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.