El género Legionella (familia Legionellaceae, orden Legionellales) comprende bacilos Gram negativos pleomórficos, finos o cocobacilares en muestras clínicas, no esporulados, aerobios estrictos, móviles por uno o varios flagelos polares o laterales, no fermentadores e intracelulares facultativos de protozoos acuáticos y macrófagos humanos.

Identificación microbiológica:

• Examen directo y tinción:

  • Tinción de Gram: Se tiñe débilmente con la safranina convencional (se recomienda extender el tiempo del colorante de contraste a 2-5 minutos con fucsina básica) o emplear la tinción de Giménez.

• Requisito nutricional absoluto (L-cisteína y hierro):

  • Incapacidad de crecimiento: No desarrolla en agar sangre de carnero, agar chocolate convencional ni agar MacConkey.

  • Medio de elección: Agar BCYE (Extracto de Levadura con Carbón Activado y Tampón alpha-ketoglutarato), suplementado obligatoriamente con L-cisteína y pirofosfato férrico.

  • Prueba de dependencia: Verificación de crecimiento en BCYE suplementado con L-cisteína frente a la ausencia total de desarrollo en BCYE libre de L-cisteína.

• Morfología colonial y características diferenciales:

  • Tras 3 a 5 días de incubación a 35-37 °C con humedad, las colonias presentan aspecto en "cristal molido" o "vidrio esmerilado", de centro blanco-grisáceo y bordes fimbriados o iridiscentes bajo estereomicroscopio.

  • Legionella pneumophila: Muestra autofluorescencia azul-blancuzca bajo luz ultravioleta de onda larga (365 nm), es catalasa y oxidasa débilmente positiva, e hidroliza el hipurato (prueba diferencial clave frente a otras especies del género como L. micdadei).

Actualización tecnológica y significación clínica: Legionella pneumophila (principalmente el serogrupo 1) es el agente causal de la enfermedad del legionario (neumonía grave) y la fiebre de Pontiac. En la práctica clínica moderna, la confirmación microbiológica se realiza rutinariamente mediante espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) a partir del cultivo en BCYE, mientras que el diagnóstico rápido e inmediato se efectúa por detección de antígeno urinario (específico para L. pneumophila serogrupo 1) y paneles de PCR multiplex en muestras del tracto respiratorio inferior.

Fuente:

1. Procop GW, Church DL, Hall GS, Janda WM, Koneman EW, Schreckenberger PC, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7th ed. Philadelphia: Wolters Kluwer Health; 2017.

2. Carroll KC, Pfaller MA, Landry ML, McAdam AJ, Patel R, Richter SS, Warnock DW, editors. Manual of Clinical Microbiology. 12th ed. Washington, DC: ASM Press; 2019.